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ADCP Bioassay Effector Cell FcγRIIa (H variant)-NFAT/Jurkat

CBP74106

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I. Background

      ADCP(Antibody dependent cellular phagocytosis)是抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的吞噬作用。 是一種免疫消除機(jī)制,其憑借單克隆抗體(mAb)靶向腫瘤細(xì)胞,以促進(jìn)吞噬免疫細(xì)胞將 腫瘤細(xì)胞從體內(nèi)清除。ADCP 由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞和樹(shù)突細(xì)胞通過(guò)表達(dá) FcγRIIa(CD32a)、FcγRI(CD64)和 FcγRIIIa(CD16a)來(lái)介導(dǎo)來(lái)吞噬疾病細(xì)胞,研究表 明 FcγRIIa 是參與該過(guò)程的 FcγR 受體。

      傳統(tǒng)用于測(cè)定 ADCC/ADCP 的方法主要依賴于相關(guān)原代免疫細(xì)胞的分離、體外分化, 進(jìn)而測(cè)量靶細(xì)胞的殺傷或吞噬效應(yīng)。這些方法高度依賴供體原代細(xì)胞,價(jià)格昂貴且費(fèi)時(shí)費(fèi) 力,對(duì)原代細(xì)胞的分離分化過(guò)程對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的要求非常高,實(shí)驗(yàn)失敗風(fēng)險(xiǎn)較大,由于分離 分化細(xì)胞純度問(wèn)題,還存在檢測(cè)信號(hào)低以及不穩(wěn)定均一的問(wèn)題。另外,原代細(xì)胞具有不可 再生性,每次實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞供體來(lái)源可能都不一致,實(shí)驗(yàn)結(jié)果可重復(fù)性較差,可能存在批次 差異。由于以上這些因素的影響,在需要高質(zhì)量控制的藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中,很難建立穩(wěn)定可 靠的檢測(cè)方法。

 
II. Description

      ADCP Bioassay Effector Cell FcγRIIa(H variant) -NFAT Jurkat 報(bào)告基因藥靶模型很好的 模擬了體內(nèi) ADCP 的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程,原理見(jiàn)下圖所示。
 


 

Figure 1. ADCP Bioassay Effector Cell FcγRIIa(H variant) -NFAT Jurkat 細(xì)胞模型原理圖
 
III. Introduction
Host Cell: Jurkat
Expressed gene: FcγRIIa (H variant)-NFAT
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS+1 μg/ml Puromycin+400 μg/ml Hygromycin B
Storage: Liquid nitrogen
Application(s): Functional(Report Gene) Assay
 
IV. Description of Host Cell Line
Organism: Human
Tissue: Peripheral blood
Disease: Childhood T acute lymphoblastic leukemia
Morphology: Lymphoblast
Growth Properties: Suspension
 
Ⅴ. Representative Data

Figure 2. Dose Response of Rituximab in ADCP Bioassay Effector Cell FcγRlla (H variant) -NFAT Jurkat (C2) with Raji.

  

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